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详细介绍下原代细胞的培养条件

发表时间:2022-02-22 10:09

  原代细胞非常接近并能反映体内生长特性,适用于药敏试验、细胞分化等实验研究。原代细胞培养物,也称为原代培养物,是从供体体外获得的组织细胞的一种培养物。这是建立细胞系的一个步骤和基本技术。下面介绍下原代细胞的培养条件:

细胞

  一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养

  1、细胞要彻底冲洗干净,尽可能消除消化液的毒性。

  2、细胞接种浓度要稍高,至少5×108个细胞/L。

  3. 培养基可在Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)中培养。

  4、 胎牛血清浓度为10%-80%;

  必须在含 5.5% CO2 的 37°C 培养箱中培养。

  6、前两天减少震动,防止刚贴壁的细胞脱落漂浮。

  7、如果电芯基本贴壁生长并逐渐形成网络,则需要更换原电池。

  8. 使用骨髓或外周血中的漂浮细胞培养1周时,细胞悬液在更换培养基前应低速离心。

  二、悬浮细胞培养

  1、原代培养时要尽量去除红细胞;

  2、短期培养可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行。

  3. 可在5至8 x 109 / L的细胞浓度范围内进行瓶试验。

  4、长期培养时,应在淋巴细胞中加入生长因子,在白血病细胞中加入少量原患者血清,以促进细胞增殖。

  5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;

  6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。


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